Analýza zdraví buněk
Reagencie, soupravy a nástroje pro analýzu buněčného zdraví měří obecné a specifické ukazatele vitality buněčných kultur. Testy životaschopnosti lze použít jako obecné měřítko zdraví buněk nebo k posouzení účinků léčby spolu s testy cytotoxicity. Testy proliferace často používají syntézu DNA a dělení buněk jako měřítko metabolické aktivity buněk v důsledku podmínek nebo ošetření. Soupravy pro stanovení cytotoxicity mohou k posouzení metabolické aktivity využívat odečty bioredukce.
Kontaminace kultury je jednou z nejčastějších překážek efektivní a spolehlivé kultivace buněk. Ačkoli některé kontaminanty lze odhalit svědomitou mikroskopickou kontrolou kultur, kontaminanty jako mykoplazma vizuálním metodám detekce unikají. Kultury by proto měly být místo toho rutinně kontrolovány pomocí souprav a činidel, které spolehlivě detekují mikrobiální kontaminanty. Reagencie, které minimalizují a eliminují kontaminaci, pokud k ní dojde, jsou nezbytným vybavením kultivační místnosti, které doplňuje sterilní techniku a správné postupy v kultivační místnosti.
Naše komplexní nabídka v oblasti buněčného zdraví zahrnuje
Testy životaschopnosti a proliferace buněk
Testy pro měření proliferace a životaschopnost buněk slouží ke sledování reakce a zdraví buněk v kultuře po působení různých podnětů. Vhodná volba metody testu závisí na počtu a typu buněk, které mají být hodnoceny, a také na očekávaném výsledku. Testy buněčné proliferace mohou sledovat počet buněk v průběhu času, počet buněčných dělení, metabolickou aktivitu nebo syntézu DNA. Počítání životaschopnosti buněk pomocí barviv, jako je trypanová modř nebo kalcein-AM, může poskytnout jak rychlost proliferace, tak procento životaschopných buněk. 5(6)-karboxyfluorescein diacetát N-succinimidyl ester (CFSE) (21888, SCT110) je oblíbenou volbou pro měření počtu buněčných dělení, kterými populace prošla. Po vstupu do buňky je CFSE štěpen intracelulárními esterázami za vzniku fluorescenční sloučeniny a sukcinimidylesterová skupina kovalentně reaguje s primárními aminy na intracelulárních proteinech. Při každém dělení se intenzita fluorescence každé dceřiné buňky sníží na polovinu, což umožňuje jednoduchou detekci počtu dělení buněk pomocí průtokové cytometrie.
Metabolismus MTT na formazanovou sůl životaschopnými buňkami, jak je znázorněno na 96jamkové destičce
Naše komplexní nástroje a řešení pro měření životaschopnosti a proliferace buněk využívají různé metody a zahrnují:
- Testy proliferace syntézou DNA
- Metabolické testy proliferace
- Luminiscenční testy životaschopnosti buněk
- Testy proliferace s fluorescenčním barvivem
- Trojité barvení živých/mrtvých/celkových buněk pro 3D kultury
- Počítání životaschopnosti s vyloučením barviva trypanové modři
Testy cytotoxicity
Testy, které měří metabolickou aktivitu, jsou vhodné pro analýzu proliferace, životaschopnosti a cytotoxicity. Redukce tetrazoliových solí, jako je MTT a XTT na barevné formazanové sloučeniny nebo bioredukce resazurinu (R7017, TOX8) probíhá pouze v metabolicky aktivních buňkách. Aktivně proliferující buňky zvyšují svou metabolickou aktivitu, zatímco buňky v tísni, jako například buňky vystavené toxinům, budou vykazovat sníženou aktivitu.
Apoptózní testy
Buněčná smrt je nezbytná pro mnoho normálních fyziologických funkcí v průběhu vývoje i homeostázy. Schopnost nádorových buněk vyhnout se programované buněčné smrti, známé také jako apoptóza, je charakteristickým znakem většiny typů rakoviny. Široká škála buněčných proteinů, včetně povrchových buněčných receptorů, adaptérů, proteáz a mitochondriálních komponent, reguluje jemnou rovnováhu mezi přežitím buněk a jejich smrtí apoptózou. Promyšlený výběr testů může pomoci analyzovat nejen účinky podmínek buněčné kultury a léčby na zdraví buněk, ale i mechanismy, kterými ovlivňují zdraví buněk. Nabízíme kompletní řadu testů pro časné, střední a pozdní stadium detekce apoptózy.
Detekce a eliminace buněčné kontaminace
Udržování buněčných kultur bez kontaminace je pro výzkum založený na buněčných kulturách zásadní. Mezi nejrozšířenější problémy buněčných kultur patří kontaminace mykoplasmou, rodem bakterií, jejichž morfologie se vyznačuje submikronovou velikostí a absencí buněčné stěny, což způsobuje, že tyto bakterie je obtížné nebo nemožné detekovat mikroskopem a jsou rezistentní vůči mnoha antibiotikům. Ačkoli mykoplazmata obvykle nezpůsobují buněčnou smrt, jsou zodpovědná za řadu účinků na kultivované buňky, které zahrnují dysregulaci metabolismu, sníženou proliferaci a chromozomální aberace. Stručně řečeno, kontaminace mykoplazmaty ohrožuje validitu postižených buněčných linií pro poskytování smysluplných údajů pro výzkum v oblasti přírodních věd.
Naše nástroje pro Detekce a eliminace mykoplazmy obsahují:
- LookOut® Mycoplasma PCR Detection Kit and other PCR and qPCR kits for reliable, sensitive unmasking of mycoplasma in cell cultures
- Tryptose phosphate broth and other reagents for detection by mycoplasma culture
- DNA barviva pro detekci mykoplazmy metodou fluorescenčního barvení DNA
- LookOut® Mycoplasma Erase spray a činidla pro dekontaminaci mykoplazmy
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?