Testování sterility

Postupy testování sterility se používají u výrobků v mnoha průmyslových odvětvích, včetně výrobců potravin a nápojů, ale hlavními průmyslovými odvětvími jsou farmaceutický a lékařský sektor, kde testování sterility výrobků zůstává pro mikrobiology důležitým a rutinním úkolem.

• Metody testování sterility ve farmacii
• Metody zkoušení sterility pro zdravotnické prostředky
• .Pracovní postup testování sterility

Metody testování sterility farmaceutických výrobků

Kompendiální metody testování sterility farmaceutických výrobků vyžadují kultivaci vzorků ve dvou oddělených médiích. Při zkoušení sterility se používají dva různé typy kultivačních médií, které podporují růst zbytkových anaerobů, stejně jako aerobů a plísní. Tekuté thioglykolátové médium (FTM) se obvykle používá ke kultivaci anaerobních a některých aerobních bakterií, zatímco ke kultivaci plísní a aerobních bakterií se obvykle používá médium sójového kaseinu (SCDM). Vzorky se před vyšetřením inkubují 14 dní při teplotě 32,5 °C a 22,5 °C. Jakýkoli zákal v kultivačním médiu může znamenat růst a musí být vyšetřen. Existují dvě doporučené metody zkoušení sterility léčivých přípravků: membránová filtrace a přímá inokulace.

Zkouška sterility membránovou filtrací

Zkouška sterility membránovou filtrací je regulační metodou volby pro filtrovatelné farmaceutické výrobky, jak je uvedeno v USP <71>, EU Pharmacopoeia < 2.6.1> a JP Pharmacopoeia <4.06>. Vzorky se propustí přes 0,45 µm membránový filtr ve filtračním kanystru a přidá se kultivační médium pro inkubaci. Tato metoda zkoušení sterility může ve srovnání s jinými metodami poskytnout vyšší citlivost, protože celý vzorek nebo směsný vzorek prochází jediným filtrem. Filtrace také poskytuje možnost opláchnout složky vzorku, které mohou způsobovat zákal nebo inhibovat růst, jako jsou antibiotika nebo konzervační látky.

Přímá inokulace Testování sterility

Při přímé inokulaci se malý objem vzorku asepticky odebere ze vzorkovací jednotky a před inkubací se naočkuje přímo do vhodného objemu kultivačního média. Tato metoda testování je sice jednoduchá, ale může mít některá významná omezení. Do kultivačního média lze naočkovat pouze malé objemy produktu, což omezuje citlivost testu. Pokud se vzorek po naočkování jeví jako zakalený nebo kalný, může být obtížné zjistit zákal způsobený mikrobiálním růstem na konci inkubační doby. Navíc, pokud má výrobek antimikrobiální vlastnosti, musí být vzorek neutralizován, aby nedošlo k inhibici mikrobiálního růstu.

Metody testování sterility zdravotnických prostředků

Pro testování sterility zdravotnických prostředků se doporučuje testování sterility přímým přenosem. Testovaný prostředek je v přímém kontaktu se zkušebním médiem po celou dobu inkubace, během níž dochází k růstu a množení jakýchkoli mikroorganismů v prostředku nebo na něm. Kromě toho se zkoušení sterility proplachováním výrobku upřednostňuje u výrobků s dutými hadičkami, jako jsou transfuzní a infuzní sestavy, kde je cesta tekutiny označena jako sterilní. Lumen výrobku se propláchne proplachovací tekutinou, eluát se membránově přefiltruje a umístí se do vhodného média k inkubaci.

Pracovní postup testování sterility

1. Zkouška sterility se provede v laboratoři. Příprava testu - Vložte hadičku membránového filtračního zařízení do čerpadla

2. Předmáčení filtru - Navlhčete membránové filtrační zařízení, abyste optimalizovali filtraci a minimalizovali vazbu produktu na filtr.

3. Filtrace vzorku - Přefiltrujte stejné množství produktu do obou kanystrů. Microorganisms are retained by a 0.45 µm pore size filter.

4. Rinsing—All inhibiting compounds are rinsed using a suitable rinse solution(s).

5. Naplnění kultivačním médiem-Membránová filtrační zařízení se naplní sterilním kultivačním médiem TSB a FTM.

6. Naplnění kultivačním médiem. Inkubační doba - 14 dní.

7. Konečné výsledky testu - vizuální kontrola zákalu / bez zákalu.