Saltar al contenido
Merck

Direct observation of individual endogenous protein complexes in situ by proximity ligation.

Nature methods (2006-10-31)
Ola Söderberg, Mats Gullberg, Malin Jarvius, Karin Ridderstråle, Karl-Johan Leuchowius, Jonas Jarvius, Kenneth Wester, Per Hydbring, Fuad Bahram, Lars-Gunnar Larsson, Ulf Landegren
RESUMEN

Cellular processes can only be understood as the dynamic interplay of molecules. There is a need for techniques to monitor interactions of endogenous proteins directly in individual cells and tissues to reveal the cellular and molecular architecture and its responses to perturbations. Here we report our adaptation of the recently developed proximity ligation method to examine the subcellular localization of protein-protein interactions at single-molecule resolution. Proximity probes-oligonucleotides attached to antibodies against the two target proteins-guided the formation of circular DNA strands when bound in close proximity. The DNA circles in turn served as templates for localized rolling-circle amplification (RCA), allowing individual interacting pairs of protein molecules to be visualized and counted in human cell lines and clinical specimens. We used this method to show specific regulation of protein-protein interactions between endogenous Myc and Max oncogenic transcription factors in response to interferon-gamma (IFN-gamma) signaling and low-molecular-weight inhibitors.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
Reactivos rojos para detección in situ Duolink®
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Sonda para PLA® in situ Duolink® anti-conejo PLUS, Affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG (H+L)
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Sonda para PLA® in situ Duolink® anti-ratón MINUS, Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Detection Reagents Orange
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Detection Reagents FarRed
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Sonda para PLA® in situ Duolink® anti-conejo MINUS
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse PLUS
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Detection Reagents Green
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Wash Buffers, Fluorescence
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPI
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Probemaker PLUS
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Probemaker MINUS
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Goat MINUS, Affinity purified Donkey anti-Goat IgG (H+L)
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Goat PLUS
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Microplate Nuclear Stain, Anti-Fade
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Duolink® In Situ Microplate Heat Transfer Block
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad