NGLYFL-RO

N-glycosidase F

recombinant form of the gene from Flavobacterium meningosepticum

• Synonyme(s) : N-glycosidase F, PNGase F, Peptide-N-glycosidase F, peptide-N⁴-(acétyl-β-glucosaminyl)-asparagine amidase
• Numéro de classification (Commission des enzymes): 3.5.1.52 (BRENDA, IUBMB)
• Code UNSPSC : 12352204

Propriétés

• Source biologique: bacterial (Flavobacterium meningosepticum)
• Niveau de qualité: 100
• Produit recombinant: expressed in E. coli
• Conjugué: (N-linked)
• Pureté: ≥90% (SDS-PAGE)
• Forme: lyophilized
• Activité spécifique: >25000 units/mg protein
• Poids mol.: 35.5 kDa
• Produit purifié par: electrophoresis
• Conditionnement: pkg of 100 U (11365185001); pkg of 250 U (11365193001)
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Conditions de stockage: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• Technique(s): activity assay: suitable
• Couleur: colorless
• pH optimal: 7.0-8.0
• Solubilité: water: soluble
• Adéquation: suitable for enzyme test
• Activité étrangère: Endoglycosidase F, none detected; a-Fucosidase, present; b-Galactosidase, present; b-N-Acetylhexosaminidase, present; dA(17h ≤100 units, present
• Température de stockage: 2-8°C

Description

Description générale

La N-glycosidase F (PNGase F) est une puissante enzyme qui hydrolyse les liaisons glycosylamine. Elle permet également de produire un peptide sans hydrate de carbone et un oligosaccharide à motif di-N-acétylchitobiose.

La N-glycosidase F, une enzyme aussi connue sous le nom de PNGase F, est une asparagine amidase issue de Flavobacterium meningosepticum. C'est un outil précieux couramment utilisé dans la recherche sur les protéines pour étudier et analyser la N-glycosylation.

Spécificité

Hydrolyse de tous types de chaînes N-glycaniques des glycopeptides et glycoprotéines, sauf présence de résidus fucose internes liés en α(1,3) dans les glycoprotéines de plantes et d'insectes. Absence d'activités protéolytiques contaminantes (x = H ou sucre[s]), conformément aux procédures de contrôle qualité en vigueur.

Application

La N-glycosidase F a été utilisée pour déglycosyler des N-glycoprotéines.

La N-glycosidase F peut être utilisée pour cliver tous types de N-glycanes liés à des asparagines, sous réserve que les groupements amine et carboxyle se trouvent tous deux dans une liaison peptidique et que l'oligosaccharide soit au moins aussi long que le noyau chitobiose. Les produits de la réaction sont l'ammoniac, l'acide aspartique (dans la chaîne peptidique) et l'oligosaccharide complet.
Remarque : La N-glycosidase F recombinante est également disponible sous forme de solution.

Définition de l'unité

Une unité correspond à l'activité enzymatique qui hydrolyse 1 nmol de dabsyl-glycopeptide fibrine ou 0,2 nmol de dansyl-glycoprotéine fétuine en 1 minute, à 37 °C et à pH 7,8.

Forme physique

Solution limpide et incolore après reconstitution.

Notes préparatoires

Conditions de stockage (solution de travail) : entre 2 °C et 8 °C
La solution reconstituée reste stable pendant au moins quatre semaines à une température de 2 °C à 8 °C.

Reconstitution

Dissoudre le contenu dans 0,1 ml d'eau redistillée (pack de 100 unités) ou 0,25 ml d'eau bidistillée (pack de 250 unités) pour obtenir une concentration de 100 mM de tampon phosphate de sodium et de 25 mM d'EDTA (pH 7,2).
Remarque : La N-glycosidase F recombinante est également disponible sous la forme d'une solution contenant 50 % de glycérol.

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 13 - Non Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 2
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash