ABE1462

Anticorps anti-phospho LSD1 (Ser 112)

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonyme(s) : Lysine-specific histone demethylase 1A, Ser 112 phosphorylated, BRAF35-HDAC complex protein BHC110, Ser 112 phosphorylated, Flavin-containing amine oxidase domain-containing protein 2, Ser 112 phosphorylated
• Code UNSPSC : 12352203
• eCl@ss : 32160702
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: rabbit
• Niveau de qualité: 100
• Forme d'anticorps: affinity isolated antibody
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: polyclonal
• Produit purifié par: affinity chromatography
• Espèces réactives: human, mouse
• Réactivité de l'espèce (prédite par homologie): rat (based on 100% sequence homology), porcine (based on 100% sequence homology), zebrafish (based on 100% sequence homology), rhesus macaque (based on 100% sequence homology)
• Technique(s): dot blot: suitable; western blot: suitable
• Numéro d'accès NCBI: NP_598633
• Numéro d'accès UniProt: Q6ZQ88
• Conditions d'expédition: wet ice
• Modification post-traductionnelle de la cible: phosphorylation (pSer112 )
• Informations sur le gène: human ... KDM1A(23028)

Description

Description générale

L'histone déméthylase 1A spécifique à la lysine (UniProt Q6ZQ88 ; également nommée protéine BHC110 du complexe BRAF35-HDAC, protéine 2 contenant un domaine amine-oxydase contenant de la flavine) est codée par le gène Kdm1a (également nommé Aof2, Kiaa0601, Lsd1) (identifiant du gène 99982) chez les espèces murines. La déméthylase spécifique à la lysine (LSD) dépendante de FAD+ (LSD1) est une composante des complexes de co-répresseurs REST (CoREST) qui médient la répression de gènes en catalysant la déméthylation des histones H3 Lys4 (H3K4me1/2) mono et diméthylées. La LSD1 est aussi impliquée dans le processus d'activation génétique associé aux récepteurs nucléaires, par l'intermédiaire de la déméthylation de H3K9me1/2. En outre, on sait que la LSD1 déméthyle les substrats non-histone tels que p53 et Dnmt1. La phosphorylation de la LSD1 par la PKCalpha au niveau de la Ser112 a été décrite, et conduit à une régulation de l'horloge circadienne dépendante de la signalisation de la PKCalpha. La phosphorylation de la Ser112 déclenche l'interaction de la LSD1 avec CLOCK:BMAL1, facilitant l'activation transcriptionnelle dépendante de la séquence E-box. Des souris knock-in porteuses des allèles Lsd1(SA/SA) codant pour des formes mutantes LSD1-S112A à phosphorylation défaillante montrent des modifications du rythme circadien dans le comportement locomoteur, avec une atténuation de l'expression des gènes de l'horloge interne et une régularisation anormale de l'horloge circadienne.

Spécificité

La désignation de la Ser112 repose sur la séquence KDM1A/LSD1 murine (UniProt Q6ZQ88). La Ser112 murine est équivalente à la Ser111 humaine et à la Ser106 de rat (UniProt O60341 et F1MA31). La spécificité de cet anticorps polyclonal a été confirmée par analyse dot blot utilisant le peptide immunogène et le peptide non phosphorylé correspondant, ainsi que par analyse western blotting de la phosphorylation cible induite par PMA : le traitement du lysat de cellules à la phosphatase lambda avant l'analyse par western blotting a complètement aboli la détection des bandes cibles [Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53:791-805].

Immunogène

Peptide linéaire correspondant à une séquence de LSD1 de souris contenant la Ser112 phosphorylée.

Épitope : pSer112.

Application

Analyse par dot blot : un lot représentatif a permis de détecter le peptide immunogène avec Ser112 phosphorylée (équivalent à la pSer111 humaine), mais pas le peptide correspondant avec Ser112 non phosphorylée [Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53:791-805].
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter l'induction de la phosphorylation de la LSD1 humaine exprimée de manière exogène lors d'un traitement au PMA de transfectants HEK293T affamés pendant 24 heures. La LSD1 phosphorylée a été détectée dans la fraction nucléaire – mais pas dans la fraction cytosolique – et le traitement concomitant par l'inhibiteur de PKC Go 6976 (réf. 365250) a empêché la phosphorylation de la LSD1 induite par le PMA [Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53:791-805].
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter une phosphorylation de LSD1 dépendante du temps dans des extraits de foie de souris maintenus dans un cycle continu d'obscurité. Des extraits nucléaires de cellules MEF à différents moments après induction de la transcription du gène circadien par un traitement à la dexaméthasone ont aussi fait apparaître une oscillation de type circadien du niveau de phosphorylation de la LSD1 [Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53:791-805].

L'anticorps anti-phospho-LSD1 (Ser112) est un anticorps dirigé contre la phospho-LSD1 (Ser112), destiné à une utilisation en western blotting et dot blot.

Qualité

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HEK293T humaines présentant une surexpression de LSD1.

Analyse par western blotting : une dilution au 1/500e de cet anticorps a permis de détecter la phosphorylation induite par PMA de LSD1 humaine exprimée de manière exogène chez des transfectants HEK293T affamés pendant 24 heures. Le traitement de la membrane à la phosphatase lambda avant le test par l'anticorps a complètement aboli la détection de la bande cible.

Description de la cible

Poids réel (observé) : env. 115 kDa. Poids théorique (calculé : 92,90/95,16 kDa (isoforme humaine 1/2), 92,85 (souris) et 94,60 kDa (rat). Une ou plusieurs bandes non caractérisées peuvent apparaître avec certains lysats.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable