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  • BMP Signaling Regulates Bone Morphogenesis in Zebrafish through Promoting Osteoblast Function as Assessed by Their Nitric Oxide Production.

BMP Signaling Regulates Bone Morphogenesis in Zebrafish through Promoting Osteoblast Function as Assessed by Their Nitric Oxide Production.

Molecules (Basel, Switzerland) (2015-04-29)
Thomas Windhausen, Steeve Squifflet, Jörg Renn, Marc Muller
ABSTRACT

Bone morphogenetic proteins (BMPs) control many developmental and physiological processes, including skeleton formation and homeostasis. Previous studies in zebrafish revealed the crucial importance of proper BMP signaling before 48 h post-fertilization (hpf) for cartilage formation in the skull. Here, we focus on the involvement of the BMP pathway between 48 and 96 hpf in bone formation after 96 hpf. Using BMP inhibitors and the expression of a dominant-negative BMP receptor, we analyze whether the loss of BMP signaling affects osteoblastogenesis, osteoblast function and bone mineralization. To this end, we used the transgenic zebrafish line Tg(osterix:mCherry), detection of nitric oxide (NO) production, and alizarin red staining, respectively. We observed that inhibition of BMP signaling between 48 and 72 hpf led to a reduction of NO production and bone mineralization. Osteoblast maturation and chondrogenesis, on the other hand, seemed unchanged. Osteoblast function and bone formation were less affected when BMP signaling was inhibited between 72 and 96 hpf. These results suggest that for the onset of bone formation, proper BMP signaling between 48 and 72 hpf is crucial to ensure osteoblast function and ossification. Furthermore, detection of NO in developing zebrafish larvae appears as an early indicator of bone calcification activity.

MATERIALI
N° Catalogo
Marchio
Descrizione del prodotto

Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, Hybri-Max, sterile-filtered, BioReagent, suitable for hybridoma, ≥99.7%
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Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, for molecular biology
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Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, sterile-filtered, BioPerformance Certified, meets EP, USP testing specifications, suitable for hybridoma
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Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, ≥99.5% (GC), suitable for plant cell culture
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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Sigma-Aldrich
Cloruro di calcio, BioUltra, for molecular biology, ~1 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Cloruro di calcio, anhydrous, BioReagent, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥96.0%
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SAFC
Sodio cloruro, 5 M
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Sigma-Aldrich
Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate, 98%
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Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Cloruro di calcio, anhydrous, powder, 99.99% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
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Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, PCR Reagent
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Sigma-Aldrich
Cloruro di calcio, AnhydroBeads, −10 mesh, ≥99.9% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, anhydrous, ≥99.9%
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, BioXtra, ≥99.5% (AT)
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Sigma-Aldrich
Sodium chloride-35Cl, 99 atom % 35Cl
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Sigma-Aldrich
Cloruro di calcio
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Sigma-Aldrich
Cloruro di calcio, AnhydroBeads, −10 mesh, ≥99.99% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sodio cloruro, 0.85%
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Sigma-Aldrich
Dimetil solfossido, meets EP testing specifications, meets USP testing specifications
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Sigma-Aldrich
8-Octanoyloxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid trisodium salt, suitable for fluorescence, ≥90% (HPCE)
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