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SAE0152

Sigma-Aldrich

Lisozima

free of DNA contaminants, suitable for Microbiome research, lyophilized powder, protein ≥90%, ≥40,000 units/mg protein

Sinonimo/i:

Mucopeptide N-acetilmuramoil idrolasi, Muramidasi

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About This Item

Numero CAS:
Classificazione EC (Enzyme Commission):
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.77

Origine biologica

chicken egg white

Livello qualitativo

Forma fisica

powder

Attività specifica

≥40000 units/mg protein

PM

single-chain 14.3 kDa

Caratteristiche

DNA free

tecniche

cell based assay: suitable

Compatibilità

suitable for cell lysis

applicazioni

cell analysis

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

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Descrizione generale

Purified Lysozyme DNA free SAE0152 undergoes strict quality control testing to ensure the absence of detectable levels of contaminating DNA using 35 cycles PCR amplification of 16S and 18S rDNA using universal primer sets.

Lysozyme is a single chain polypeptide of 129 amino acids cross-linked with four disulfide bridges.1 It hydrolyzes b(1à 4) linkages between N-acetylmuraminic acid and N-acetyl-D-glucosamine residues in peptidoglycan and between N-acetyl-D-glucosamine residues in chitodextrin.2,3,4 The enzyme is often used for lysing bacterial cells by hydrolyzing the peptidoglycan present in the cell walls. Gram-positive cells are quite susceptible to this hydrolysis as their cell walls have a high proportion of peptidoglycan. Gram-negative bacteria are less susceptible due to the presence of an outer membrane and a lower proportion of peptidoglycan.
The enzyme is active over a broad pH range (6.0-9.0).

Lysozyme activity: ≥40,000 units/mg protein.

For isolation of nucleic acids, lysozyme has been used in the lysis peptidoglycan layer of bacterial cell walls.
The study of microbial communities has been revolutionized in recent years by the widespread adoption of culture independent analytical techniques such as 16S rRNA gene sequencing and metagenomics. Since DNA contamination during sample preparation is a major problem of these sequence-based approaches, DNA extraction reagents free of DNA contaminates are essential. This purified lysozyme preparation (SAE0152) is purified from chicken egg white, crystallized three times, dialyzed, and supplied as a lyophilized powder. Protein content by UV absorbance is ≥ 90% with the remainder (∼10%) being buffer salts such as sodium acetate and sodium chloride, and undergoes strict quality control testing to ensure the absence of detectable levels of contaminating DNA using 35 cycles PCR amplification of 16S and 18S rDNA using universal primer sets.

Applicazioni

  • Lysozyme is used for the extraction of genomic DNA from bacterial cells.
  • Lysozyme is used as an external standard for MALDI-TOF (matrix assisted laser desorption ionization-time of flight) mass analysis.
  • Lysonzyme is used to prepare spheroplasts.
L'enzima rompe le pareti cellulari dei batteri; è utilizzato per preparare gli sferoplasti.

Azioni biochim/fisiol

Il lisozima idrolizza i legami β(1→4) tra l′ acido N-acetilmurammico e i residui di N-acetil-D-glucosammina nel peptidoglicano e tra i residui di N-acetyl-D-glucosammina nella chitodestrina. Le cellule Gram-positive sono molto sensibili a questa idrolisi poiché le loro pareti cellulari hanno un'elevata percentuale di peptidoglicano. I batteri Gram-negativi sono meno sensibili in quanto posseggono una membrana esterna e hanno una percentuale inferiore di peptidoglicano. Tuttavia, queste cellule possono essere idrolizzate in presenza di EDTA che chela gli ioni metallici nella membrana esterna.

L'enzima è attivo in un ampio intervallo di pH (da 6,0 a 9,0). A pH 6,2, l'attività massima si osserva su una gamma più ampia di forze ioniche (da 0,02 a 0,100 M) rispetto a pH 9,2 (da 0,01 a 0,06 M).

Caratteristiche e vantaggi

Purified Lysozyme free SAE0152 undergoes strict quality control testing to ensure it will be Free of DNA contaminants, suitable for Microbiome research.

The study of microbial communities has been revolutionized in recent years by the widespread adoption of culture independent analytical techniques such as 16S rRNA gene sequencing and metagenomics. Since DNA contamination during sample preparation is a major problem of these sequence-based approaches, DNA extraction reagents free of DNA contaminates are essential.

Definizione di unità

One unit will lyse 0.6 μg of Micrococcus lysodeikticus per minute by turbidimetric detection at 600 nm when suspended in buffer at pH 6.2 at 25 °C.

Pittogrammi

Health hazard

Avvertenze

Danger

Indicazioni di pericolo

Consigli di prudenza

Classi di pericolo

Resp. Sens. 1

Codice della classe di stoccaggio

11 - Combustible Solids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 3

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable


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Enzymatic cell lysis and protoplast prep processes demystified, revealing complex enzymatic reactions during sample preparation.

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