Milieu de Eagle modifié par Dulbecco (DMEM)
Parmi les milieux de culture cellulaire et tissulaire définis, le milieu de Eagle modifié par Dulbecco (DMEM) est un des milieux le plus largement adaptés à de nombreux phénotypes de cellules adhérentes. Il s'agit de cellules de mammifères, d'insectes et de plantes. Le milieu de Eagle original a été mis au point dans les années 1950 et a été formulé pour la culture de cellules de poulet. Cependant, la modification de Dulbecco est une formulation supplémentée améliorée qui augmente la teneur en acides aminés et en vitamines jusqu'à quatre fois par rapport au milieu de Eagle d'origine.
En culture cellulaire, le DMEM est utilisé comme milieu pour favoriser la croissance de différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. La version modifiée du DMEM peut également être utilisée pour diverses applications de recherche telles que la découverte de médicaments, l'ingénierie tissulaire et l'étude des voies de signalisation cellulaire.
Le DMEM n'est pas un milieu complet en soi, car il manque de nutriments nécessaires comme les protéines, les lipides ou les facteurs de croissance. Il doit donc être complété par d'autres composants, tels que le sérum veau fœtal (FBS), les acides aminés et d'autres nutriments, afin de fournir un environnement de croissance complet et équilibré aux cellules en culture.
Notre sélection comprend différentes concentrations de glucose, ainsi que des formulations avec et sans L-glutamine. Des produits sans rouge de phénol (indicateur de pH) sont disponibles pour les applications sensibles aux œstrogènes. D'autre part, notre offre complète comprend des formats liquides pratiques et prêts à l'emploi, ainsi que des poudres, plus économiques, pour un stockage simplifié et une plus longue durée de conservation.
DMEM – à forte teneur en glucose / à faible teneur en glucose
Le DMEM est disponible dans différentes formulations, en fonction des besoins spécifiques des cellules en culture et des objectifs du travail expérimental. Le milieu initial était formulé avec un faible taux de glucose de 1 g/l, adapté à la culture de cellules sensibles à un taux élevé de glucose et qui risquent de ne pas se développer dans des milieux contenant des taux élevés de ce sucre. Cependant, le DMEM à forte teneur en glucose contient 4,5 g/l de glucose et est généralement utilisé pour la culture de cellules qui nécessitent des niveaux élevés de glucose pour une croissance optimale.
Milieux sans sérum (SFM)
Le sérum est un composant de nombreux milieux de culture cellulaire ; il est souvent utilisé pour supplémenter les milieux en hormones, facteurs de croissance et autres nutriments nécessaires à la croissance et à la prolifération des cellules. Cependant, le sérum peut contenir des impuretés et des contaminants susceptibles d'interférer avec les résultats expérimentaux et son utilisation peut soulever des problèmes éthiques.
Les milieux sans sérum sont formulés sans sérum animal ou autres composants d'origine animale. Ces milieux sont constitués de formulations nutritionnelles et hormonales appropriées qui favorisent la croissance et la prolifération des cellules en culture.
L'utilisation de milieux sans sérum pour la culture cellulaire présente notamment l'avantage d'accroître la productivité, d'améliorer l'homogénéité, et de faciliter la purification et le traitement en aval. Les milieux sans sérum peuvent également être formulés avec des combinaisons spécifiques de facteurs de croissance pour certains types de cellules et objectifs de recherche. Ces milieux conviennent à un large éventail d'applications de culture cellulaire, notamment la production de protéines recombinantes, l'étude de la croissance et de la différenciation cellulaires, l'étude des voies de signalisation cellulaire, la production de vaccins viraux, ainsi que la découverte et le développement de médicaments.
L'un de ces milieux sans sérum est le DMEM avec le mélange de nutriments F-12 de Ham, qui est utilisé pour la croissance des cellules de mammifères, notamment des cellules MDCK, des cellules gliales, des fibroblastes, des cellules endothéliales humaines et des fibroblastes de rats. Le DMEM contient de fortes concentrations d'acides aminés, de glucose et de vitamines et le mélange F12 de Ham apporte du zinc, de la putrescine, de l'hypoxanthine et de la thymidine. Des tampons, tels que le FBS et l'HEPES, peuvent être inclus pour compenser la perte du pouvoir tampon.
DMEM avec et sans rouge de phénol
Le rouge de phénol est un indicateur de pH qui change de couleur à différentes valeurs de pH. Il est généralement ajouté au DMEM à une concentration de 0,01-0,03 %. Il est utile pour contrôler le pH du milieu et s'assurer qu'il reste dans la plage appropriée pour la croissance et le métabolisme des cellules.
Certaines cellules peuvent être sensibles au rouge de phénol ou peuvent être affectées par sa présence dans le milieu, c'est pourquoi il existe également du DMEM sans rouge de phénol. Pour certaines applications en aval, comme l'analyse des protéines ou l'analyse de l'expression des gènes, la présence de rouge de phénol dans le milieu peut constituer une interférence. Pour certaines techniques d'imagerie, telles que la microscopie à fluorescence, l'utilisation de DMEM sans rouge de phénol peut également être nécessaire pour obtenir des résultats précis. Le rouge de phénol absorbe la lumière dans le spectre visible et peut donc interférer avec la précision de ces techniques. Le choix entre le DMEM avec ou sans rouge de phénol dépend des besoins et exigences spécifiques des cellules en culture et des objectifs du travail expérimental.
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