MABF919

Anti-Ly108/Slamf6-Antikörper, Klon 3E11

clone 3E11, from rat

• Synonym(e): SLAM family member 6, CD352, NK-T-B-antigen, NTB-A, Lymphocyte antigen 108
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rat
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 3E11, monoclonal
• Speziesreaktivität: mouse
• Methode(n): flow cytometry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG2aκ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_109635.1
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q9ET39
• Versandbedingung: ambient
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: mouse ... Slamf6(30925)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Mitglied 6 der SLAM-Familie (UniProt: Q9ET39; auch bezeichnet als CD352, NK-T-B-Antigen, NTB-A, Lymphozyten-Antigen 108) wird bei murinen Spezies durch das Gen Slamf6 (auch bezeichnet als Ly108; Gen-ID: 30925) kodiert. Ly108/Slamf6 gehört zur Familie der in hämatopoetischen Zellen umfangreich exprimierten Rezeptoren signalgebender lymphozytärer Aktivierungsmoleküle (SLAMF), die 7 Mitglieder umfasst: SLAM/CD150, CD48/SLAMF2, Ly-9/CD229, 2B4/CD244, CD84/SLAMF5, Ly108/NTB-A/CD352 und CRACC. 2B4 und CD48 interagieren miteinander, während die übrigen Familienmitglieder als Selbstliganden fungieren, wobei zwei identische Moleküle auf der Oberfläche zweier verschiedener Zellen als Rezeptor und Ligand miteinander interagieren können. SLAMF-Mitglieder tragen in ihren zytoplasmatischen Schwänzen eine oder mehrere Kopien des Immunrezeptor-Tyrosin-basierten Wechselmotivs (ITSM; TxYxxV/I). Nach der Phosphorylierung auf dem Tyrosinrest vermittelt ITSM die Rekrutierung von SH2-Domäne-haltigen Signalmolekülen wie dem SLAM-assoziierten Protein (SAP), einschließlich SAP in T-, NK- und NKT-Zellen, EAT-2A und EAT-2B (murin) in NK-Zellen und APCs. Ly108/Slamf6 wird mit einer Signalpeptidsequenz (a.a. 1-30 der Maus) synthetisiert, deren Entfernung das reife Ly108 mit einer extrazellulären Region (a.a. 31-239) ergibt. Diese Region enthält einen V-Typ und eine IG-ähnliche Domäne des C2-Typs (a.a. 36-130 und 147-210), gefolgt von einer einzelnen transmembranen Domäne (a.a. 240-262) und einem zytoplasmatischen Schwanz (a.a. 263-351). Die zytoplasmatische Domäne von Ly108/Slamf6 enthält zwei Kopien von ITSM (a.a. 293-TVYAQV-298 der Maus und 317-TIYSIV-322). Alternative Spleißungen erzeugen die drei Ly108-Isoformen Ly108-1 (Ly108s; UniProt: Q9ET39-2), Ly108-2 (Ly108l; UniProt: Q9ET39-1) und Ly108-3 (von UniProt nicht angegeben), die sich in ihrer zytoplasmatischen C-terminalen Endsequenz unterscheiden, jedoch in ihrer übrigen Sequenz identisch sind.

Spezifität

Klon 3E11 weist auf der Oberfläche der jeweiligen BI-141-T-Zell-Transfektanten der Maus exogen exprimiertes murines Ly108-1 (Ly108s; UniProt: Q9ET39-2) und Ly108-2 (Ly108l; UniProt: Q9ET39-1) spezifisch nach, jedoch keine anderen Mitglieder der SLAM-Familie (2B4, CD84, CRACC, Ly-9 und SLAM). Die murinen Ly108-Spleißisoformen Ly108-1 (Ly108s; UniProt: Q9ET39-2), Ly108-2 (Ly108l; UniProt: Q9ET39-1) und Ly108-3 (von UniProt nicht angegeben) unterscheiden sich in ihrer zytoplasmatischen C-terminalen Endsequenz, sind jedoch im Rest ihrer Sequenz identisch, einschließlich der extrazellulären Region, auf die Klon 3E11 abzielt (Zhong, M.C. und Veillette, A. (2008). J. Biol. Chem. 283(28):19255-19264).

Immunogen

Epitop: extrazelluläre Domäne

Murines-Ly108-humanes-IgG1-FC-Fusionsprotein.

Anwendung

Der Anti-Ly108/Slamf6-Antikörper (Klon 3E11, Katalog-Nr. MABF919) ist ein hochspezifischer monoklonaler Ratten-Antikörper, der auf Ly108/Slamf6 abzielt und in Durchflusszytometrie, Funktionsassay, Immunpräzipitation und Western Blotting getestet wurde.

Durchflusszytometrie-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge, die mit Alexa Fluor^™ 647 vorkonjugiert wurde, wurde die Oberflächen-Immunreaktivität von Ly108 bei murinen dendritischen Zellen (DCs) sowie T-, B- und NKT-Zellen nachgewiesen, jedoch nicht bei den meisten NK-Zellen (Zhong, M.C. und Veillette, A. (2008). J. Biol. Chem. 283(28):19255-19264).

Funktionsassay: Mit einer repräsentativen Charge wurde zusammen mit einem polyklonalen Anti-Ratten-IgG-Antikörper des Kaninchens Oberflächen-Ly108 auf isolierten C57BL/6-Mäusethymozyten vernetzt, was zu einer Induktion einer SAP- und FynT-abhängigen Ly108-Tyrosin-Phosphorylierung führte (Zhong, M.C. und Veillette, A. (2008). J. Biol. Chem. 283(28):19255-19264).

Durchflusszytometrie-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge, die mit Alexa Fluor 647 vorkonjugiert wurde, wurde die Expression von exogen transfizierten murinen Ly108-1- und Ly108-2-Isoformen nachgewiesen, jedoch nicht von anderen Mitgliedern der SLAM-Familie (2B4, CD84, CRACC, Ly-9 und SLAM) auf der Oberfläche der entsprechenden BI-141-T-Zell-Transfektanten der Maus (Zhong, M.C. und Veillette, A. (2008). J. Biol. Chem. 283(28):19255-19264).

Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde zusammen mit einem polyklonalen Anti-Ratten-IgG-Antikörper des Kaninchens eine Immunpräzipitation von Oberflächen-Ly108 aus isolierten C57BL/6-Mäusethymozyten durchgeführt (Zhong, M.C. und Veillette, A. (2008). J. Biol. Chem. 283(28):19255-19264).

Western-Blotting-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden exogen exprimierte murine Ly108-1- und Ly108-2-Isoformen in Lysaten der jeweiligen BI-141-T-Zell-Transfektanten der Maus nachgewiesen (Zhong, M.C. und Veillette, A. (2008). J. Biol. Chem. 283(28):19255-19264).

Forschungskategorie
Entzündung & Immunologie

Qualität

Beurteilt mittels Durchflusszytometrie an Splenozyten der Maus.

Durchflusszytrometrie-Analyse: Mit 1 µg dieses Antikörpers wurde Ly108/Slamf6 auf der Oberfläche von einer Million Maus-Splenozyten nachgewiesen.

Zielbeschreibung

33,26/36,44 kDa (reif/Pro-Lys108-1; UniProt: Q9ET39-2), 35,46/38,64 kDa (reif/Pro-Lys108-2; UniProt: Q9ET39-1), 35,94/39,12 kDa (reif/Pro-Lys108-3) berechnet. Ein Bericht sprach von einem breiten Band von ~65 kDa (Zhong, M.C. und Veillette, A. (2008). J. Biol. Chem. 283(28):19255–19264) infolge einer posttranslationalen Glykosylierung und Phosphorylierung.

Physikalische Form

Aufgereinigtes monoklonales IgG2a der Ratte in Puffer mit PBS ohne Konservierungsmittel.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Rechtliche Hinweise

ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies

Haftungsausschluss

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