Accéder au contenu
Merck
Toutes les photos(5)

Key Documents

MABE343

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-puromycine, clone 12D10

clone 12D10, from mouse

Synonyme(s) :

Anti-Puromycin, Clone 12D10 Anti-Puromycin, Puromycin Detection Antibody

Se connecterpour consulter vos tarifs contractuels et ceux de votre entreprise/organisme


About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

12D10, monoclonal

Espèces réactives

human

Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)

all

Technique(s)

flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

Isotype

IgG2aκ

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... NPEPPS(9520)

Description générale

La puromycine est un antibiotique aminoglycoside dérivée de la bactérie Streptomyces alboniger. Il agit comme inhibiteur de la synthèse des protéines, en induisant la terminaison prématurée de la chaîne protéique dans le ribosome. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent être utilisés avec des méthodes d′immunochimie standard pour examiner directement la traduction, à l′aide d′une méthode appelée « SUnSET » (surface sensing of translation). Son utilité dans les analyses de la traduction des protéines provient du fait qu′une partie de la molécule ressemble à l′extrémité 3′ de l′aminoacyl-ARNt. La puromycine induit la fragmentation de l′ADN dans les thymocytes et les cellules leucémiques humaines HL-60.

Spécificité

Anticorps anti-puromycine, clone 12D10 : réaction vérifiée avec un échantillon test humain préalablement incubé avec de la puromycine. Réaction anticipée avec toutes les espèces lorsque l'échantillon test est incubé avec de la puromycine.

Immunogène

Puromycine dérivée de Streptomyces alboniger

Application

Analyse par western blot (marquage des protéines totales) : Des lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement ont été résolus sur SDS-PAGE et transférés sur une membrane. Les protéines ont été visualisées par coloration au rouge Ponceau S.

Analyse par immunochimie : Une dilution au 1/10 000ème d′un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HeLa traitées à la puromycine.

Analyse par western blot : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées par western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.; Clavarino, G., et al. (2012). PLoS Pathog. 8(5):e1002708.; David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.; Hulmi. J. J., et al. (2012). Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(1):E41-50.; Bhattacharya, A., et al. (2012). Neuron. 76(2):325-337.; Hoeffer, C. A., et al. (2013). J Neurophysiol. 109(1):68-76.).

Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.;David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; David, A., et al. (2011). J Biol Chem. 286(23):20688-20700.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Goodman, C. A., et al. (2012). Proc Natl Acad Sci USA. 109(17):E989.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.).

Analyse par immunohistochimie : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par IHC (Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.).

Analyse par triage de cellules marquées par fluorescence (FACS) : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

Alexa Fluor est une marque déposée de Life Technologies.
Catégorie de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire
L′anticorps anti-puromycine, clone 12D10, détecte la puromycine incorporée dans les protéines. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent être utilisés avec des méthodes d′immunochimie standard.
Sous-catégorie de recherche
Métabolisme de l′ARN et protéines de liaison

Qualité

Évalué par western blot dans des lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement.

Analyse par western blot  À une dilution au 1/25 000ème, cet anticorps détecte les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine uniquement. Cet anticorps détecte également une plus faible quantité de protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide.

Description de la cible

La puromycine est incorporée dans les protéines nouvellement synthétisées. En présence de puromycine uniquement, cet anticorps détecte les protéines nouvellement synthétisées de multiples poids moléculaires qui ont incorporé la puromycine. Cependant, un signal plus faible est obtenu lorsque le cycloheximide est également présent, car il inhibe la biosynthèse des protéines dans les organismes eucaryote.

Forme physique

Anticorps monoclonal IgG2aκ purifié dans un tampon contenant 0,1 M de Tris-glycine, pH 7,4, 150 mM de NaCl et 0,05 % d′azoture de sodium.
Format : purifié
Protéine G purifiée

Stockage et stabilité

Stable pendant 1 an entre 2 et 8 °C à partir de la date de réception.

Remarque sur l'analyse

Contrôle
Lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement.

Autres remarques

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d′analyse.

Informations légales

ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies

Clause de non-responsabilité

Sauf indication contraire dans nos catalogues ou autre documentation de la Société accompagnant de(s) produit(s), nos produits sont conçus uniquement pour la recherche et ne peuvent pas être utilisés dans d′autres buts, ce qui inclut mais sans s′y limiter, les utilisations commerciales non autorisées, les utilisations de diagnostic in vitro, les usages thérapeutiques ex vivo ou in vivo et tout type de consommation par ou d′application à l′homme ou aux animaux.

Vous ne trouvez pas le bon produit ?  

Essayez notre Outil de sélection de produits.

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".

Déjà en possession de ce produit ?

Retrouvez la documentation relative aux produits que vous avez récemment achetés dans la Bibliothèque de documents.

Consulter la Bibliothèque de documents

Les clients ont également consulté

Thomas Chaillou et al.
Journal of cellular physiology, 231(9), 1894-1902 (2015-12-20)
The ribosome has historically been considered to have no cell-specific function but rather serve in a "housekeeping" capacity. This view is being challenged by evidence showing that heterogeneity in the protein composition of the ribosome can lead to the functional
Daniel W D West et al.
The Journal of physiology, 594(2), 453-468 (2015-11-10)
Ribosome biogenesis is the primary determinant of translational capacity, but its regulation in skeletal muscle following acute resistance exercise is poorly understood. Resistance exercise increases muscle protein synthesis acutely, and muscle mass with training, but the role of translational capacity
Preeti Shahi et al.
PLoS neglected tropical diseases, 10(1), e0004340-e0004340 (2016-01-07)
Entamoeba histolytica is an obligate protozoan parasite of humans, and amebiasis, an infectious disease which targets the intestine and/or liver, is the second most common cause of human death due to a protozoan after malaria. Although amebiasis is usually asymptomatic
Hanna Hörnberg et al.
The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience, 36(50), 12697-12706 (2016-12-16)
The establishment of precise topographic maps during neural development is facilitated by the presorting of axons in the pathway before they reach their targets. In the vertebrate visual system, such topography is seen clearly in the optic tract (OT) and
Anna Maria Copeland et al.
Journal of virology, 87(21), 11659-11669 (2013-08-24)
Rift Valley fever virus (RVFV), an ambisense member of the family Bunyaviridae, genus Phlebovirus, is the causative agent of Rift Valley fever, an important zoonotic infection in Africa and the Middle East. Phlebovirus proteins are translated from virally transcribed mRNAs

Articles

Explore the basics of working with antibodies including technical information on structure, classes, and normal immunoglobulin ranges.

Explore the basics of working with antibodies including technical information on structure, classes, and normal immunoglobulin ranges.

Antibodies combine with specific antigens to generate an exclusive antibody-antigen complex. Learn about the nature of this bond and its use as a molecular tag for research.

Antibodies combine with specific antigens to generate an exclusive antibody-antigen complex. Learn about the nature of this bond and its use as a molecular tag for research.

Protocoles

Learn key steps in flow cytometry protocols to make your next flow cytometry experiment run with ease.

Learn key steps in flow cytometry protocols to make your next flow cytometry experiment run with ease.

Learn key steps in flow cytometry protocols to make your next flow cytometry experiment run with ease.

Explore our flow cytometry guide to uncover flow cytometry basics, traditional flow cytometer components, key flow cytometry protocol steps, and proper controls.

Afficher tout

Notre équipe de scientifiques dispose d'une expérience dans tous les secteurs de la recherche, notamment en sciences de la vie, science des matériaux, synthèse chimique, chromatographie, analyse et dans de nombreux autres domaines..

Contacter notre Service technique