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Kit de génotypage de souris à démarrage à chaud KAPA

Synonyme(s) :

génotypage, génotypage de souris

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About This Item

Code UNSPSC :
41106300
Nomenclature NACRES :
NA.55

Utilisation

sufficient for 100 reactions (KK7351)
sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions (KK7352)
sufficient for 500 reactions

Niveau de qualité

Durée de conservation

≤18 mo.

Caractéristiques

dNTPs included
hotstart

Fabricant/nom de marque

Roche

Technique(s)

PCR: suitable
genotyping: suitable

Entrée

crude DNA

Température de stockage

−20°C

Description générale

Les kits de génotypage de souris à démarrage à chaud KAPA HotStart® comprennent le système KAPA Express Extract, nouveau système de tampon et de protéase thermostable qui permet d'extraire de l'ADN prêt pour PCR à partir de tissus de souris en seulement 15 minutes, ainsi que le mélange pour génotypage rapide KAPA2G Fast avec colorant, qui contient une ADN polymérase créée par évolution dirigée pour présenter une haute processivité et une très grande rapidité. L'utilisation conjointe du système KAPA Express Extract et du mélange pour génotypage rapide KAPA2G Fast permet d'extraire et d'amplifier des fragments d'ADN de manière fiable à partir de tissus de souris en seulement 1 heure, contre plus de 24 heures avec les protocoles classiques. Le kit de génotypage de souris à démarrage à chaud KAPA HotStart® est conçu pour l'extraction et l'amplification rapides de l'ADN contenu dans des tissus de souris.

Application

Le kit de génotypage de souris à démarrage à chaud KAPA HotStart® a été utilisé dans les applications suivantes :
  • extraction et amplification de tissus de queue, d'oreille ou d'orteil de souris
  • extraction et amplification d'ADN à partir d'autres tissus d'origine animale

Caractéristiques et avantages

Augmentation de la cadence d'analyse, diminution du délai d'exécution et amélioration de la fiabilité.
  • Production d'ADN prêt pour la PCR en seulement 15 minutes.
  • Manipulations minimales, réduisant le risque de perte d'échantillon ou de contamination.
  • Quantité de matrice suffisante pour plusieurs analyses, facilement adaptable à la manipulation d'échantillons sur des plaques de 96 puits.
  • Amplification fiable et rapide de fragments d'ADN pour une large gamme de longueurs d'amplicon et de taux de GC.

Dépassement des performances des méthodes d'extraction brute et des kits du commerce
  • Réduction des temps d'exécution
  • Augmentation de la spécificité
  • Réduction des coûts

Remarques :
  • Extraction d'ADN prêt pour la PCR à partir de tissus de queue, d'oreille ou d'orteil de souris en 15 minutes.
  • Avant de procéder à la PCR, diluer dix fois l'extrait d'ADN dans du tampon Tris-HCl 10 mM (pH 8,0–8,5), puis utiliser 1 μl d'ADN par réaction de 25 μl.
  • Les extraits sont stables > 6 mois à -20 °C.
  • Le Mélange de génotypage rapide (à démarrage à chaud) KAPA2G contient l'ADN polymérase rapide KAPA2G modifiée pour PCR rapide, ainsi qu'un tampon, du MgCl2 (1,5 mM en 1X) et des dNTP (0,2 mM chacun en 1X).
  • Le Mélange de génotypage rapide KAPA2G comprend un tampon de charge pour électrophorèse contenant un colorant, ce qui permet de placer directement les produits de PCR sur des gels d'agarose pour l'analyse.
  • Utiliser un temps d'hybridation de 15 s, en rajoutant 15 s pour les amplicons < 1 kb, ou 15–30 secondes de plus par kilobase pour les amplicons plus longs.

Qualité

Tous les constituants des Kits de génotypage de souris à démarrage à chaud KAPA sont soumis à des tests de contrôle qualité exigeants, ne présentent aucune activité endonucléase/exonucléase contaminante et répondent à des critères stricts en matière de contamination par l'ADN.

Notes préparatoires

Veillez toujours à ce que le produit soit complètement décongelé et bien mélangé avant utilisation. Les réactifs peuvent être conservés à 4 °C pour une utilisation à court terme (1 mois maximum). Pour un stockage à long terme, replacez-les à -20 °C. Si tous les composants ont été manipulés avec soin et n'ont pas été contaminés, la qualité du kit ne devrait pas être altérée si le kit est laissé (accidentellement) à température ambiante pendant une courte durée (3 jours maximum).

Autres remarques

Produit réservé aux activités de recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations légales

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

Composants de kit seuls

Réf. du produit
Description

  • KAPA Express Extract Enzyme 1 U/µL

  • 10X KAPA Express Extract Buffer

  • 2X KAPA2G Fast HotStart® Genotyping Mix with dye

Pictogrammes

Health hazard

Mention d'avertissement

Warning

Mentions de danger

Classification des risques

STOT SE 2

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

does not flash

Point d'éclair (°C)

does not flash


Certificats d'analyse (COA)

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Pinheiro I, et al.
bioRxiv, 309054-309054 (2018)
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