Protocole d'adhésion cellulaire à la poly-L-Lysine

Utilisation de poly-lysine pour faire adhérer les cellules à une surface

La poly-L-lysine est un facteur d'attachement cellulaire non spécifique qui permet de favoriser l'adhésion des cellules aux substrats solides en augmentant les interactions électrostatiques entre les ions chargés négativement de la membrane cellulaire et de la surface de culture. Une fois adsorbée sur la surface de culture, la poly-lysine augmente le nombre de sites de fixation cellulaire chargés positivement. Le protocole ci-après concerne les produits identifiés par les références P4707*, P4832*, P7280, P6407, P7405, P9155, P6282 et P5899. 

Il convient de déterminer les conditions optimales pour chaque lignée cellulaire et chaque application.

1. Ajouter 50 ml d'eau stérile de qualité "culture tissulaire" à 5 mg de poly-lysine.
2. Recouvrir la surface de culture de manière aseptique à raison de 1,0 ml pour 25 cm² (uniquement). Incliner doucement d'avant en arrière et de gauche à droite afin de recouvrir uniformément la surface de culture.
3. Au bout de 5 minutes, aspirer la solution et rincer soigneusement la surface avec de l'eau stérile de qualité "culture tissulaire".
4. Laisser sécher au moins 2 heures avant d'introduire les cellules et le milieu.

* REMARQUE : L'étape 1 n'est pas nécessaire pour les solutions de poly-lysine (réf. P4707 et P4832).