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AccueilProduitsBiologie des protéinesPréparation d'échantillons de protéinesPurification FLAG®

Purification FLAG®

Vue rapprochée d'un environnement de laboratoire. L'image est centrée sur une pipette bleue versant une gouttelette dans un petit récipient en verre partiellement rempli d'un liquide de couleur rose. L'arrière-plan, flou, suggère la présence de divers autres instruments ou contenants de laboratoire.

Les étiquettes FLAG® permettent une détection plus performante et une purification robuste des protéines de fusion recombinantes. Leur utilité a été démontrée dans de nombreuses applications en aval, des tests de capture aux analyses structurales en passant par les dosages d'activité. L'étiquette épitope FLAG® est un peptide de huit acides aminés court et hydrophile (étiquette DYKDDDDK) qui est facilement clivable par l'entérokinase (EK). En raison de sa petite taille et de son caractère hydrophile, l'étiquette FLAG® se trouve généralement à la surface de la protéine de fusion, ce qui limite ses effets sur la fonction, la sécrétion ou le transport de la protéine de fusion. Quelle que soit votre application finale, nous avons les outils qu'il vous faut pour exprimer, purifier et détecter les protéines de fusion FLAG®. 

Aperçu du contenu

Représentation graphique montrant un motif constitué de lignes et de cercles violets interconnectés sur un fond jaune. L'image ressemble à une structure moléculaire simplifiée ou à un schéma de réseau, évoquant les thèmes de l'interconnectivité ou des relations.

Expression de protéines à étiquette FLAG®

Notre gamme de produits d'expression de protéines marquées par une étiquette FLAG® comprend des vecteurs pour l'expression efficace de protéines de fusion recombinantes en bactéries et en cellules de mammifères. La technologie SnapFast™ vous permet de déplacer facilement le gène d'intérêt d'un vecteur à un autre pour un clonage plus efficace et plus économique.

  • Le peptide FLAG® standard (séquence : DYKDDDDK) est une petite étiquette qui peut être incorporée avec un risque minime d'encombrement stérique ou d'impact négatif sur la solubilité de la protéine.
  • La séquence de l'étiquette 3xFLAG® fusionne trois épitopes FLAG® en tandem pour une détection encore plus performante (jusqu'à 200 fois plus performante) des protéines de fusion.
Fond jaune vif avec au centre un carré violet aux coins arrondis. À l'intérieur du carré se trouve une figure symétrique comprenant trois flèches horizontales pointant vers la droite. Une ligne verticale court de haut en bas et passe par leurs centres de symétrie. Sont éparpillés autour de ces flèches des formes géométriques, à savoir des cercles et des diamants ou des losanges.

Purification de protéines à étiquette FLAG®

Nous proposons une diversité de gels d'agarose pour la purification par affinité, de billes magnétiques, de kits de purification et de plaques revêtues pour l'isolement et la purification des protéines marquées par une étiquette FLAG®.

  • Les gels d'agarose pour affinité permettent de purifier les protéines contenant une étiquette de fusion grâce à des anticorps anti-FLAG® greffés sur de l'agarose en billes. Adaptées à la purification à petite ou grande échelle, ces résines conviennent à la purification sur colonne gravitaire.
  • Les billes magnétiques anti-FLAG® M2 sont utilisées pour purifier les protéines recombinantes avec étiquette de fusion, une plateforme ou un rack magnétique étant utilisé pour séparer les billes et isoler les protéines pour un traitement rapide.
  • Les plaques de 96 puits revêtues d'anticorps anti-FLAG® M2 ultrasensibles conviennent au criblage par expression, à l'étude des interactions entres protéines ainsi qu'aux les tests ELISA.
Dessin artistique formé d'une ligne violette sur un fond jaune, ressemblant à une représentation abstraite de la lettre Y. La forme, simple, est constituée de traits épurés sans fioritures ou textures supplémentaires.

Détection de protéines à étiquette FLAG®

Les étiquettes FLAG® et 3xFLAG™ comportent des sites de liaison à des anticorps monoclonaux anti-FLAG® hautement spécifiques, ainsi qu'à des anticorps polyclonaux et des conjugués pour les tests ELISA, les applications de transfert sur membrane (blotting), l'immunofluorescence, l'immunocytochimie, l'immunohistochimie et la cytométrie en flux.

  • L'anticorps anti-FLAG® M2 fixe les protéines de fusion à étiquette FLAG® N-terminale, à étiquette FLAG® C-terminale et à étiquette Met-FLAG®.
  • La liaison de l'anticorps anti-FLAG® M1 est calcium-dépendante et spécifique de l'extrémité N-terminale de l'étiquette FLAG®.
  • L'anticorps anti-FLAG® M5 fixe les protéines de fusion à étiquette FLAG® N-terminale et Met-FLAG®.
* IP = immunoprécipitation ; IC = immunochimie, WB = western blotting ; EIA = Enzyme Immunoassay (dosage immunoenzymatique)

Ressources apparentées

  • Brochure: Refine Protein Preparation

    Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, MilliporeSigma is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.

  • User Guide: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins

    The FLAG Expression System is an established way to express, purify, and detect recombinant fusion proteins. FLAG and 3×FLAG® have proven utility in numerous applications such as Western blotting, immunocytochemistry, immunoprecipitation, flow cytometry, protein purification, and in the study of protein-protein interactions, cell ultrastructure, and protein localization. These small hydrophilic tags facilitate superior detection and purification of recombinant fusion proteins when using our highly specific and sensitive ANTI-FLAG® antibodies.

  • Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

    The strength and specificity of interactions between biomolecules have been exploited for years in biochemical research. Affinity-based protein purification techniques have been used extensively to isolate and purify specific proteins or classes of proteins from complex biochemical mixtures, such as cell lysates..

Catégories de produits apparentées
Purification d'anticorps à l'aide de protéines
Colonnes préremplies et résines de purification d'anticorps pour l'échelle de laboratoire, l'échelle de production et l'échelle industrielle
Purification de protéines recombinantes/avec étiquette de fusion
Optimisez la purification des protéines grâce à notre gamme de résines d'affinité et de tampons pour de multiples étiquettes et techniques de purification.
Gels et tampons pour l'électrophorèse des protéines
Gels de polyacrylamide précoulés, tampons de migration et réactifs pour gels de polyacrylamide coulés à la main pour l'électrophorèse PAGE et SDS-PAGE des protéines.
Colorants pour gels d'électrophorèse de protéines
Colorants pour gels de séparation de protéines pour détection colorimétrique et détection en fluorescence ultrasensibles, solutions de fixation et réactifs de décoloration pour gels de polyacrylamide, gels d'agarose et membranes en PVDF et nitrocellulose.
Purification de protéines biotinylées
Résines streptavidine et avidine et colonnes préremplies pour la purification à petite ou grande échelle des anticorps et protéines biotinylés.
Réactifs de fractionnement subcellulaire, d'enrichissement et de déplétion
Le fractionnement subcellulaire et l'enrichissement en protéines permettent l'identification et l'étude des protéines dans le cadre de la recherche en protéomique. Nous proposons un large choix de kits de traitement d'échantillons cellulaires, tissulaires, bactériens, végétaux et autres pour le fractionnement subcellulaire ainsi que l'extraction, la déplétion et l'enrichissement en protéines.
Tampons de lyse cellulaire et réactifs d'extraction de protéines
Kits d'extraction de protéines, tampons de lyse cellulaire et réactifs permettant de solubiliser les protéines à partir de cultures de cellules de bactéries, de levures et d'insectes ainsi que de plantes et de mammifères et d'échantillons de tissus.
Inhibiteurs de phosphatases et de protéases
Les inhibiteurs et les cocktails d'inhibiteurs préservent l'activité des protéines durant la lyse cellulaire et la préparation des échantillons, en empêchant la protéolyse et la déphosphorylation.
Applications apparentées
Purification des protéines
Techniques, réactifs et protocoles permettant de purifier les protéines recombinantes par différentes méthodes telles que la chromatographie d'échange d'ions, la chromatographie d'exclusion stérique ou la chromatographie d'affinité.
Expression des protéines
Technologies d'expression protéique permettant d'exprimer des protéines recombinantes dans des systèmes d'expression de type E. coli, cellules d'insectes, levures et cellules de mammifères pour la recherche fondamentale et pour faciliter la production de médicaments et de vaccins.
Lyse et extraction des protéines
Panorama des méthodes de lyse cellulaire et d'extraction protéique, comme la solubilisation par détergents, la lyse par congélation/décongélation, le choc osmotique, la sonication, la lyse cellulaire enzymatique et les techniques de fragmentation mécanique comme l'homogénéisation au Dounce, au Polytron ou au mortier et au pilon.
Technique de pull-down (interactions protéines/protéines)
Tests, réactifs et protocoles permettant d'étudier les interactions protéines/protéines in vitro par différentes méthodes : pull-down ou GST pull-down, purification par affinité en tandem (TAP pour "Tandem Affinity Purification") et co-immunoprécipitation.
Concentration des protéines et échange de tampon
Panorama des techniques utilisées pour concentrer et clarifier les échantillons de protéines pour les procédures de purification, de bioproduction et d'analyse. Inclut des protocoles et des vidéos sur les techniques de filtration et d'ultrafiltration, l'enrichissement en protéines ainsi que le dessalage et l'échange de tampon par dialyse, diafiltration et chromatographie.
Électrophorèse sur gel
L'électrophorèse sur gel permet de séparer les protéines en vue de leur purification, de leur caractérisation et de leur détection. Des méthodes comme l'électrophorèse PAGE en conditions natives, l'électrophorèse SDS-PAGE, l'électrophorèse 2D-PAGE et l'électrofocalisation permettent de préparer des applications en aval comme l'analyse par western blot, la spectrométrie de masse et l'analyse protéomique.
Analyses par western blotting
Panorama des principes et applications de l'analyse par western blotting pour la détection des protéines. Inclut des liens vers les protocoles détaillés, des vidéos et d'autres ressources sur l'extraction des protéines, l'électrophorèse sur gel, le transfert sur membranes en PVDF ou nitrocellulose, et les méthodes de détection par chimiluminescence, colorimétrie ou fluorescence.
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