Nitrato em vegetais

Determinação reflectométrica após redução a nitrito e reação com reagente de Griess.

Introdução

Os nitratos são compostos que ocorrem naturalmente e são encontrados no ar, na água, no solo e nas plantas, fazendo parte do ciclo do nitrogênio. Os seres humanos consomem nitrato de várias fontes, mas a matéria vegetal na forma de vegetais é geralmente o maior contribuinte, a menos que o teor de nitrato da água potável seja excepcionalmente alto.¹ Vários fatores podem influenciar os níveis de nitrato nos vegetais, incluindo o tipo/parte do vegetal, a frequência de cultivo, as condições climáticas, a qualidade do solo, os processos de produção de alimentos e o tipo/quantidade de fertilizantes.²

Os nitratos em si não são relativamente tóxicos, mas os metabólitos produzidos no corpo, como nitrito, óxido nítrico e compostos N-nitroso, são preocupantes, pois foram associados ao câncer e a uma condição sanguínea chamada metahemoglobinemia.³ Por isso, é importante monitorar os níveis de nitrato nos vegetais para evitar esses possíveis efeitos adversos à saúde. Aqui, descrevemos um método geral para a determinação dos níveis de nitrato em vegetais usando a reflectometria.

Método experimental

Os íons nitrato são reduzidos a íons nitrito por um agente redutor. Na presença de um tampão ácido, esses íons de nitrito reagem com uma amina aromática para formar um sal de diazônio, que, por sua vez, reage com N-(1-naftil)-etilenodiamina para formar um corante azo vermelho-violeta que é determinado por reflectometria.

Reagentes, instrumentos e materiais

Kits de teste

• Método de teste de nitrato: reflectométrico com tiras de teste 5 - 225 mg/l NO₃^- Reflectoquant^® (1.16971) ou
• Método de teste de nitrato: reflectométrico com tiras de teste 3 - 90 mg/l NO₃^- Reflectoquant^® (1.16995)

Instrumentos

• Reflectômetro RQflex^® 20 Reflectoquant^® (1.17246)

Observação: Esta nota de aplicação se refere ao RQ^® 20 e a todos os instrumentos descontinuados (RQflex^® 10, RQflex^® plus).

Preparo de amostras

• Homogeneize a amostra em um liquidificador (por exemplo, Ultra-Turrax^®).
• Pese uma amostra representativa em um béquer e adicione água destilada.
• Cubra o béquer com um vidro de relógio e ferva por cerca de 15 minutos.
• Deixe esfriar, transfira para um balão volumétrico e complete o volume final com água destilada.

As quantidades e os volumes de amostra recomendados para vários vegetais são fornecidos na tabela de preparação de amostras abaixo. Como as concentrações de nitrato podem variar substancialmente de vegetal para vegetal, o fator de diluição deve ser adequadamente adaptado.

Análise instrumental

• Pressione a tecla START do refletômetro e mergulhe simultaneamente a tira de teste na amostra (15 - 30 °C) por aprox. 2 segundos, garantindo que ambas as zonas de reação estejam imersas.
• Deixe o excesso de líquido escorrer pela borda longa da tira para uma toalha de papel absorvente.
• Aguarde durante 60 segundos e, em seguida, meça a tira no refletômetro.

O valor [mg/l] será armazenado automaticamente. (Consulte as instruções de operação do RQflex^® e as instruções de uso do testes de nitrato Reflectoquant^®).

Cálculo

Teor de nitrato [mg/kg] = Valor medido [mg/l] x Volume de água [ml] ÷ Peso da amostra [g]

Teor de nitrato [mg/kg] = Valor medido x fator

Tabela 1. Visão geral da diluição

Amostra	Peso [g]	Água adicionada [ml]	Volume final [ml]	Fator
Brócolis	10	50	100	10
Chicória	10	40	50	5
Alface crespa	10	50	100	10
Alface-de-cordeiro	5	50	100	20
Pepino	10	50	100	10
Cenoura	10	40	50	5
Couve-rábano	5	50	100	20
Pimenta	25	20	25	1
Chicória-vermelha	10	40	50	5
Rabanete	10	50	100	10
Chucrute	10	40	50	5
Tomate	25	40	50	2
Repolho branco	10	40	50	5
Abobrinha	10	50	100	10

Resultados

Tabela 2. Comparação com o método enzimático

Amostra	Reflectoquant® [mg/kg]	Enzimático [mg/kg]
Brócolis	606	464
Chicória 1	< 15	< 25
Chicória 2	57	53
Endívia 1	4967	4900
Endívia 2	376	390
Alface-de-cordeiro	4240	4270
Cenoura	74	74
Couve-rábano	1616	1639
Pimentão preto	< 3	< 5
Pimentão amarelo	6	8
Chicória-vermelha	63	55
Rabanete	94	91
Chucrute	59	51
Tomate	< 7	< 12
Repolho branco	196	107
Abobrinha 1	524	737
Abobrinha 2	1185	1170

Referências

1. 2016. WHO. Nitrate and Nitrite in Drinking-Water. Background Document for Development of WHO Guidelines for Drinking-Water Quality. Geneva, Switzerland. [Internet].

2. Salehzadeh H, Maleki A, Rezaee R, Shahmoradi B, Ponnet K. The nitrate content of fresh and cooked vegetables and their health-related risks. PLoS ONE. 15(1):e0227551. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0227551

3. 2008. Authority EFS. Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food chain on a request from the European Commission to perform a scientific risk assessment on nitrate in vegetables. The EFSA Journal.689:1-79.