The labeling reactions for this kit were performed at pH 7.
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CS0008
Enzymatic Protein Biotinylation Kit
for biotinylation of up to 20 mg target protein
Synonym(e):
Biotin labeling kit
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About This Item
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Allgemeine Beschreibung
- Temperatures ranging from 4 °C to 30 °C
- pH from 6.0 to 9.0
- NaCl concentrations from 50 to 500 mM.
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Rechtliche Hinweise
Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
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The gel for product #CS0008 suggests a similar activity of the kit at different pH values (6 - 9). However, in my hands, the reaction proceeds significantly faster at pH 8.3 compared to pH 6/7. Which conditions were used for the shown labeling reactions?
1 answer-
Helpful?
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Is the BirA protein tagged in any way (ideally FLAG) in order to remove it from the reaction mixture?
1 answer-
The BirA ligase is not tagged. There is no suggested protocol for the removal of excess ligase. However, in the presence of ATP and biotin the reaction will run to completion. Any residual ligase will remain inert. The BirA ligase has a molecular weight of 33.5 kDa. Note that excess biotin is removed by dialysis. Please see the link below to review the kit Technical Bulletin:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/700/170/cs0008bul-ms.pdfHelpful?
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