Once isolated, organoids are cultured in specialized media embedded in a rich extracellular matrix (ECM) basement membrane extract hydrogel such as Growth Factor Reduced Matrigel. Media is replenished every other day and cells are passaged once per week (7-12 days) before cells become too large or necrotic. Cells can be passaged in either small clump fragments or as single cells using mechanical dissociation/enzyme-free passaging reagents. Depending on organoid type and confluency, split ratios of roughly 1:3-1:4 can be used when passaging organoids. For sensitive organoid types, ROCKi (Y27632) (SCM075) can be added during passaging to help in promoting cell viability.
SCM301
3dGRO® Organoiden-Gefriermedium
Optimized cryopreservation media for multiple organoids cell types.
Synonym(e):
Organoid cryopreservation medium
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50 mL | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 211,00 |
Über diesen Artikel
UNSPSC Code:
12352207
NACRES:
NA.71
eCl@ss:
32160801
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technique(s)
cell culture | stem cell: suitable
General description
Organoide sind aus Primärgewebe oder Stammzellen in-vitro gewonnene 3D-Zellaggregate, die zur Selbsterneuerung, Selbstorganisation und Organfunktionalität fähig sind. Organoide überwinden die Grenzen von bestehenden 2D-Modellsystemen durch:
• Eine dem Primärgewebe ähnliche Zusammensetzung und Struktur: Organoide hegen eine kleine Population selbsterneuernder Stammzellen (wie intestinale Krypten-Stammzellen), die sich mit einer unter physiologischen Bedingungen üblichen Häufigkeit in Zellen aller größeren Zelllinien differenzieren können.
• Relevante Modelle für In-vivo-Bedingungen: Organoide sind für jedes Modellsystem biologisch relevanter und eignen sich für die Manipulation von Nischenkomponenten und Genexpression.
• Stabiles System für Langzeit-Kultivierung: Organoide können in Biobanken kryokonserviert und durch Nutzung ihrer Fähigkeit zur Selbsterneuerung und Differenzierung der Stammzellpopulationen unbegrenzt kultiviert werden.
Organoide können mittels standardmäßiger Gefriermethoden kryokonserviert werden, doch die Lebensfähigkeit der Zellen nach dem Gefrier-/Auftauzklus stellt weiterhin eine Herausforderung dar. Das 3dGRO Organoiden-Gefriermedium ist ein propietäres optimiertes Kryokonservierungsmedium für mehrere Organoidzelltypen (u.a. murine Darmorganoiden, humane Darm- und Lungenorganoiden). Das Medium fördert eine höhere Lebensfähigkeit nach dem Gefier-/Auftauzyklus im Vergleich zu anderen handelsüblichen oder selbst erzeugten Organoiden-Gefriermedien.
• Eine dem Primärgewebe ähnliche Zusammensetzung und Struktur: Organoide hegen eine kleine Population selbsterneuernder Stammzellen (wie intestinale Krypten-Stammzellen), die sich mit einer unter physiologischen Bedingungen üblichen Häufigkeit in Zellen aller größeren Zelllinien differenzieren können.
• Relevante Modelle für In-vivo-Bedingungen: Organoide sind für jedes Modellsystem biologisch relevanter und eignen sich für die Manipulation von Nischenkomponenten und Genexpression.
• Stabiles System für Langzeit-Kultivierung: Organoide können in Biobanken kryokonserviert und durch Nutzung ihrer Fähigkeit zur Selbsterneuerung und Differenzierung der Stammzellpopulationen unbegrenzt kultiviert werden.
Organoide können mittels standardmäßiger Gefriermethoden kryokonserviert werden, doch die Lebensfähigkeit der Zellen nach dem Gefrier-/Auftauzklus stellt weiterhin eine Herausforderung dar. Das 3dGRO Organoiden-Gefriermedium ist ein propietäres optimiertes Kryokonservierungsmedium für mehrere Organoidzelltypen (u.a. murine Darmorganoiden, humane Darm- und Lungenorganoiden). Das Medium fördert eine höhere Lebensfähigkeit nach dem Gefier-/Auftauzyklus im Vergleich zu anderen handelsüblichen oder selbst erzeugten Organoiden-Gefriermedien.
Application
Forschungskategorie
Zellkultur
Stammzellenforschung
Zellkultur
Stammzellenforschung
Optimiertes Kryokonservierungsmedium für mehrere Organoidzelltypen.
Preparation Note
Das 3dGRO Organoid-Gefriermedium bei -20 °C aufbewahren. Vor der Verwendung in kleinere Volumen aliquotieren, um eine Reagenzkontamination zu vermeiden.
Analysis Note
Aussehen (Farbe): Braun
Osmolalität: 250 - 350 mOsm
pH: 6,8 - 7,1
Sterilitätsprüfung: Kein Wachstum/Entspricht
Bakterien- und Pilzprüfung: Entspricht
Osmolalität: 250 - 350 mOsm
pH: 6,8 - 7,1
Sterilitätsprüfung: Kein Wachstum/Entspricht
Bakterien- und Pilzprüfung: Entspricht
Legal Information
3dGRO is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.
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| technique(s) cell culture | stem cell: suitable | technique(s) cell culture | stem cell: suitable | technique(s) cell culture | stem cell: suitable | technique(s) cell culture: suitable |
| form liquid | form liquid | form liquid | form - |
Lagerklasse
12 - Non Combustible Liquids
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How are organoids cultured?
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How Do you Extract RNA/DNA from Organoids in Cultured in Matrigel?
1 answer-
Traditional DNA/RNA isolation kits can be used to prepare genomic material for sequencing (RNA-seq, scRNA-seq, WGS, CHIP-seq etc). For some applications with large organoids, tissue specific DNA/RNA extraction kits are recommended. TRI Reagent (T9424) can be added to the dissociated organoids before RNA extraction and can be stored at -80 °C until future use.
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How do you stain organoids with antibodies?
1 answer-
Organoids can be stained with antibodies for immunocytochemical (ICC)/Immunohistochemical (IHC) analysis using either whole-mount or paraffin embedding/sectioning techniques. It is critical to use antibodies prequalified for organoid analysis.
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