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B16-OVA-MO4-Melanom-Zelllinie, murin

Mouse

Synonym(e):

B16-OVA-MO4-Zelllinie, Mausmelanomzellen, Melanom-Zelllinie

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:
41106514
NACRES:
NA.71
Biological source:
mouse
Growth mode:
N/A
Manufacturer/tradename:
Millipore

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Produktname

B16-OVA-MO4-Melanom-Zelllinie, murin,

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mouse

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vial of >1X10⁶ cells

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Millipore

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N/A

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

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−196°C

General description

Das Immunsystem kann Tumoren erkennen und zerstören. Zytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) töten neoplastische (oder viral infizierte) Zellen ab, nachdem antigene Peptide erkannt wurden, die an an ihrer Oberfläche an Klasse-I-Moleküle des wichtigsten Histokompatibilitätskomplexes (MHC) gebunden sind. Diese Peptide werden aus Antigenen gewonnen, die im Cytosol der betroffenen Zelle abgebaut werden. Immunisierungen mit abgetötetenPathogenen oder deren Proteinen lösen nicht grundsätzlich CTLs aus, da exogene Proteine nicht (zur Präsentation) in das Cytosolgelangen können. Antigene, die in phagozytische Zellen aufgenommen wurden, können jedoch in das Cytosol gelangen und für eine Klasse-I-Präsentation verarbeitet werden. Die Immunisierung mit einem gereinigten Antigen, das an ein deutlich phagozytiertes Partikel angehängt ist, führt zur Vorbereitung von CTLs, die wiederumTiere vor nachfolgenden Schwierigkeiten durch Tumore schützen, die mit dem Antigen-Gen transfiziert wurden

Application

  • Jedes Fläschchen enthält > 1 x 106 lebensfähige Zellen.
  • Die Zellen werden mit einem Maus-Essential-CLEAR-Panel von Charles River Animal Diagnostic Services negativ auf Infektionskrankheiten getestet.

Die Zellen sind nachweislich murinen Ursprungs und negativ für eine speziesübergreifende Kontamination von Ratte, chinesischem Hamster, Goldhamster, Mensch und nicht-humanen Primaten (NHP), geprüft durch ein Contamination-CLEAR-Panel von Charles River Animal Diagnostic Services.
  • Die Zellen weisen keine Mykoplasmen-Kontamination auf.

Hintergrund
Das Immunsystem kann Tumoren erkennen und zerstören. Zytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) töten neoplastische oder viral infizierte Zellen ab, nachdem antigene Peptide erkannt wurden, die an an ihrer Oberfläche an Klasse-I-Moleküle des wichtigsten Histokompatibilitätskomplexes gebunden sind. Diese Peptide werden aus Antigenen gewonnen, die im Cytosol der betroffenen Zelle abgebaut werden. Immunisierungen mit abgetöteten Pathogenen oder deren Proteinen lösen nicht grundsätzlich CTLs aus, da exogene Proteine nicht (zur Präsentation) in das Cytosol gelangen können. Antigene, die in phagozytische Zellen aufgenommen wurden, können jedoch in das Cytosol gelangen und für eine Klasse-I-Präsentation verarbeitet werden. Die Immunisierung mit einem gereinigten Antigen, das an ein deutlich phagozytiertes Partikel angehängt ist, führt zur Vorbereitung von CTLs, die wiederum Tiere vor nachfolgenden Schwierigkeiten durch Tumore schützen, die mit dem Antigen-Gen transfiziert wurden.1

Herkunft
Antigene der Tumorabstoßung – TRAs – unterscheiden sich von anderen Proteinen, die von der Zelle synthetisiert werden, dadurch, dass der Wirt sie nicht verträgt. Daher sollte praktisch jedes Fremdprotein, das von einem Tumor synthetisiert wird, einschließlich solcher, die aus in Tumorzellen transfizierten Fremdantigen-Genen exprimiert werden, wie TRAs funktionieren und sich so verhalten. Diese Hypothese wurde an einem Maus-Tumormodell getestet, das durch Transfektion des Huhn-Ovalbumin-Gens in die von C57BL/6(H-2b-Haplotyp)-abgeleitete murine Melanom-Zelllinie B16 entwickelt wurde, gefolgt von Auswahl und Isolierung des mit Ovalbumin(OVA)-transfizierten B16-Klons B16-OVA-MO4.1.
Im In-vitro-Provokationstest stimulierten B16-OVA-MO4-Zellen die OVA+-KB-spezifische T-Zell-Hybridoma RF33.70 zur Produktion von Interleukin-2, während dies bei nicht-transfizierten B16-Zellen nicht erfolgte. Die intradermal in syngenetische C57BL/6-Mäuse injizierten B16 und B16-OVA-MO4 wuchsen progressiv, metastasierten und töteten die Tiere, was belegte, dass die Expression des Ovalbumin-Antigens allein diesen Tumor nicht ausreichend immunogen macht, um ihn abzustoßen. Die subkutane Immunisierung von C57Bl/6-Mäusen mit Ovalbumin, konjugiert an Eisen-Beads (OVA-Fe), schützte jedoch Tiere mit B16-OVA-MO4 (aber nicht B16) sowohl vor lokalem Tumorwachstum als auch vor dem Tod. Dieser Ansatz könnte genutzt werden, um Tumor- und Virusimpfstoffe zu entwickeln.1

Referenzen
1. Falo LD Jr, Kovacsovics-Bankowski M, Thompson K, Rock KL. Nat. Med. 1995; 1(7):649-653.
2. Fidler IJ. Cancer Res. 1975; 35(1):218-224.


Hinweis: Provirale DNA des murinen xenotropen Retrovirus Bxv-1 wird in B16-OVA-MO4 Zellen nachgewiesen, BXV-1 ist ein Pathogen der biologischen Schutzstufe 2 (BSL-2).

Features and Benefits

Die B16-OVA-MO4-Zelllinie ist ein Modell für die Immuntherapie bei Krebs, die Ovalbumin (OVA) exprimiert, um eine starke Immunantwort auf Tumorantigene zu ermöglichen.

Preparation Note

Die Zellen sollten bis zum Gebrauch in Flüssigstickstoff aufbewahrt werden. Die Zellen können nach dem ersten Auftauen für mindestens 10 Passagen kultiviert werden, ohne dass die Expression und Funktionalität der Zellmarker wesentlich beeinträchtigt wird.

Other Notes

Dieses Produkt ist für den Verkauf vorgesehen und wird ausschließlich an akademische Einrichtungen für interne akademische Forschungszwecke gemäß „Academic Use Agreement“ verkauft, wie in der Produktdokumentation näher erläutert.

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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cell culture | mammalian: suitable

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cell culture | mammalian: suitable

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cell based assay: suitable, cell culture | mammalian: suitable

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−196°C

storage temp.

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-

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−196°C

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Millipore

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Lagerklasse

10 - Combustible liquids

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Questions

1–2 of 2 Questions  
  1. Is the cell line derived from B16-F10?

    1 answer
    1. The cell line was derived from C57BL/6 mice (H-2b haplotype) as B16, followed by transfection with the pAc-new-OVA plasmid.

      Helpful?

  2. What are the details regarding the B16-OVA line? Specifically:

    What is the suggested selection antibiotic and concentration for culturing? Regarding Ova expression, is it cytosolic, surface, or secreted? Is the cell line derived from B16F10 or a different line? How was the line genetically modified for Ova expression?

    1 answer
    1. For culturing, it is recommended to ue 1 mg/ml Geneticin (G418; Sigma 345810) as the selection antibiotic and concentration.

      The Ova expression in the B16-OVA cell line is related to the presentation of the OVA peptide, SIINFEKL, with its surface class I molecules.

      The cell line was derived from C57BI/6 mice (H-2b haplotype) as B16, followed by transfection with the pAc-new-OVA plasmid.

      The line was genetically modified for Ova expression through transfection with the pAc-new-OVA plasmid.

      Helpful?

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