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Kompetente Tuner(DE3)pLysS-Zellen – Novagen

Escherichia coli, rod shaped

• Synonym(e): Tuner Competent cells
• UNSPSC-Code: 41106202
• NACRES: NA.81

Eigenschaften

• product name: Kompetente Tuner(DE3)pLysS-Zellen – Novagen, Tuner host strains are lacZY deletion mutants of BL21, which enable adjustable levels of protein expression throughout all cells in a culture. T7 lysozyme expression suppresses basal T7 expression.
• Biologische Quelle: Escherichia coli
• Qualitätsniveau: 100
• Hersteller/Markenname: Novagen^®
• Lagerbedingungen: OK to freeze; avoid repeated freeze/thaw cycles
• Wachstumsmodus: adherent or suspension
• Morphologie: rod shaped
• Methode(n): microbiological culture: suitable
• Zelltransformation: transformation efficiency: >2×10⁶ cfu/μg
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −70°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Genotyp: F^–ompT hsdS_B (r_B^– m_B^–) gal dcm lacY1(DE3) pLysS (Cam^R)





Dieses Produkt enthält genetisch veränderte Organismen (GVO). In der EU sind GVO durch die Richtlinien 2001/18/EG und 2009/41/EG des Europäischen Parlaments und Rates und ihre nationale Umsetzung in den Mitgliedstaaten reguliert. Wir sind aufgrund dieser Vorschriften gesetzlich verpflichtet, bestimmte Informationen zu Ihrer Person und zu der Einrichtung, in der die GVO verwendet werden, anzufordern. Das Endverbleibserklärungsformular (EVE-Formular) ist hier here zu finden.

Die Tuner-Stämme sind lacZY-Deletionsmutanten von BL21 und ermöglichen ein anpassbares Niveau der Proteinexpression in allen Zellen einer Kultur. Die lac-Permease(lacY)-Mutation ermöglicht einen einheitlichen Eintritt von IPTG in alle Zellen der Population, was zu einer konzentrationsabhängigen, homogenen Induktion führt. Durch Anpassung der IPTG-Konzentration kann die Expression von sehr niedrigen Werten bis hin zu den robusten, vollständig induzierten Werten, die üblicherweise mit pET-Vektoren verbunden sind, reguliert werden. Eine geringere Expression kann die Löslichkeit und Aktivität schwieriger Zielproteine verbessern.

DE3 weist darauf hin, dass der Wirt ein Lysogen von λDE3 ist und daher eine chromosomale Kopie des T7-RNA-Polymerase-Gens enthält, das durch den lacUV5-Promoter kontrolliert wird. Solche Stämme eignen sich zur Herstellung von Protein aus Zielgenen, die in pET-Vektoren kloniert werden, wobei IPTG als Induktor verwendet wird.

pLysS-Stämme exprimieren T7-Lysozym, das die basale Expression von T7-RNA-Polymerase vor der Induktion weiter unterdrückt, wodurch die pET-Rekombinanten, welche Zielproteine codieren, die das Zellwachstum und die Zellviabilität beeinflussen, stabilisiert werden.

Tuner-Wirtsstämme sind lacZY-Deletionsmutanten von BL21, die ein anpassbares Niveau der Proteinexpression in allen Zellen einer Kultur ermöglichen. Die Expression von T7-Lysozym unterdrückt die basale T7-Expression.

Komponenten

0,4 ml1 mlKomponente

•2 × 0,2 ml5 × 0,2 mlKompetente Tuner(DE3)pLysS-Zellen

•2 × 2 ml4 × 2 mlSOC-Medium

•2 ng2 ngTest-Plasmid

Warnhinweis

Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)

Rechtliche Hinweise

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 2