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Purificación FLAG®

Un primer plano de un entorno de laboratorio. El foco principal es una pipeta azul que dispensa una gota en un pequeño recipiente de vidrio parcialmente lleno de un líquido de color rosa. El fondo, aunque borroso, sugiere la presencia des otros varios instrumentos o recipientes de laboratorio.

Las etiquetas FLAG® permiten una detección superior y una purificación sólida de proteínas de fusión recombinantes, con una utilidad probada en numerosas aplicaciones posteriores, desde ensayos de unión y actividad hasta análisis estructurales. La etiqueta epítopo FLAG® es un péptido corto de ocho aminoácidos hidrófilo (etiqueta DYKDDDDDK) que es fácilmente escindible por la enterocinasa (EK). Debido a su pequeño tamaño y su naturaleza hidrófila, la etiqueta FLAG® reside normalmente en la superficie de la proteína de fusión, lo que minimiza los efectos sobre la función, la secreción o el transporte de la proteína de fusión. Con independencia de cuál sea su aplicación final, tenemos las herramientas necesarias para expresar, purificar y detectar proteínas de fusión FLAG® . 

Visión general de la sección

Representación gráfica con un patrón de círculos y líneas morados interconectados sobre un fondo amarillo. El diseño recuerda una estructura molecular simplificada o a un diagrama de red, lo que sugiere temas de interconectividad o relaciones.

Expresión de la proteína etiqueta FLAG®

Nuestra cartera de productos de expresión de las proteínas etiquetas FLAG® consta de vectores para la expresión eficiente de proteínas de fusión recombinantes en sistemas bacterianos y de mamífero. La tecnología de vectores SnapFast™ le permite mover fácilmente el gen de interés de un vector a otro para una clonación más eficiente y rentable.

  • El péptido FLAG® estándar (secuencia: DYKDDDDK) es una etiqueta pequeña que puede incorporarse con un riesgo mínimo de impedimento estérico o de impacto negativo en la solubilidad de las proteínas
  • La secuencia de la etiqueta 3xFLAG® fusiona tres epítopos FLAG® en tándem para una mejor detección (hasta 200X) de las proteínas de fusión
un fondo amarillo vibrante con un cuadrado morado en el centro que tiene esquinas redondeadas. Dentro del cuadrado, hay un diseño simétrico con tres flechas horizontales: una en la parte superior que apunta hacia la izquierda y la derecha, una en el centro que apunta hacia ambos lados desde el centro, y otra en la parte inferior que refleja la flecha superior. Una línea vertical baja de la flecha superior a la inferior a través de sus puntos de simetría. Esparcidos alrededor de estas flechas hay formas geométricas: círculos y diamantes o rombos.

Purificación de la proteína etiqueta FLAG®

Ofrecemos una variedad de geles de purificación por afinidad de agarosa, microesferas magnéticas, kits de purificación y placas recubiertas para el aislamiento y la purificación de proteínas etiquetadas con FLAG®.

  • Los geles de afinidad de agarosa permiten la purificación de proteínas de fusión etiquetadas utilizando anticuerpos anti-FLAG® reticulados con agarosa granulada, y son adecuados para la purificación a pequeña o gran escala; estas resinas son adecuadas para purificación en columna de flujo por gravedad.
  • Las microesferas magnéticas anti-FLAG®M2 se utilizan para purificar proteínas recombinantes de fusión etiquetadas utilizando una gradilla o plataforma magnética para separar las microesferas y aislar la proteína para un procesamiento rápido.
  • Las placas de 96 pocillos recubiertas con anti-FLAG®de gran sensibilidad M2 son adecuadas para el cribado de expresión, el estudio de interacciones proteína-proteína y los ensayos ELISA.
Arte lineal de color morado sobre un fondo amarillo, que se asemeja a una representación abstracta de la letra “K.” El diseño es simple con líneas limpias y sin adornos o texturas añadidas.

Detección de la etiqueta FLAG®

Las etiquetas FLAG® y 3xFLAG™ incluyen sitios de unión para anticuerpos monoclonales anti-FLAG® muy específicos, así como anticuerpos policlonales y conjugados para ELISA, aplicaciones de transferencia, inmunofluorescencia, inmunocitoquímica, inmunohistoquímica (IHC), transferencia y citometría de flujo.

  • El anticuerpo M2 anti-FLAG® se une a las proteínas de fusión N-terminal FLAG®, C-terminal FLAG®y Met-FLAG®.
  • La unión del anticuerpo M1 anti-FLAG®depende del calcio y es específica para el N-terminal de la etiqueta FLAG®.
  • El anticuerpo M5 anti-FLAG® se une a las proteínas de fusión N-terminal FLAG® y Met-FLAG®.
*IP=inmunoprecipitación; IC=inmunoquímica, WB=inmunoelectrotransferencia, EIA=enzimoinmunoanálisis de absorción (ELISA)

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  • Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

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